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猪场人工受精全套技术流程与要点介绍

来源: 2016-03-06 10:11:03| 查看:

猪人工授精是指猪场通过使用采精器械采取公猪的精液,然后通过对这些精液进行检查,处理和保存后,再用受精器械将合格的精液输入到发情母猪的生殖道内,代替猪只自然交配的一种配种方法。在目前的生猪养殖种方面,猪人工受精因使用优势突出而成为世界通用的一种主流配种方法。因此,对于猪场来说,掌握一套最核心的、最全面的猪人工受精技术,熟悉人工受精每个环节的操作要点,方是猪场增加产能,长期发展之道。

一、人工授精的优势

1、降低生产成本

2、便于生产与管理

3、减少疾病传播风险

4、最大程度利用优良公猪性状(包括提高公猪利用率和减少公猪饲养数量)

5、有利于优良品种及优良父系的推广

6、有利于克服公、母猪因体形等性状悬殊过大,不利于本交的困难

7、可提高配种成绩

8、能够远程运输

9、能够在使用前检查精子的质量,提高配种率等等。

二、人工授精操作成功的关键因素

1、选择有耐心、细心、责任心的配种员;

2、不断对结果(配种率、分娩率、产仔数、畸形率等)进行分析,以便提高生产成绩;

3、 选择实践经验丰富的行家(注意:不是专家)对员工进行培训;

4、 素质高(耐心、细心和责任心,而不一定是文化水平高)的配种员(实践证明甚至是刚毕业未养过猪的中专生都可)搞人工受精可以一步到位,不必逐渐过渡(特别是新猪场);

5、 正确认真的操作人工授精过程中每一步(采精、检查、稀释、包装、冷却、贮存、输精等)非常重要,这是人工授精结果理想满意的前提。

三、人工授精的要点与难点

1、精液的采集、处理、贮存的操作三要领(基础);

2、发情鉴定工作非常重要,最好的方法就是对母猪进行(2次/天)试情,一定要牵着公猪(性欲、性情、年龄等);

3、 母猪发情后何时输精?(后备、经产、断配间距等);

4、 输精动作要点:轻插、适深、慢注、轻拔。

四、猪场如何从本交向人工授精操作过渡

1、如果猪场初次进行人工授精或配种员经验不足,担心将来生产成绩不理想,那么最好先搞1+2=NN+aI+aI,即第一次本交,第二、三次人工授精;其理由是:配种员经验不足,发情检定不准,掌握不好第一次配种(或输精)的最佳时间,而本交会解决这个问题;但是如果在专业人工授精行家的指导下(采用傻瓜式查情方式、傻瓜式配种方式等),人工授精可一次性完成(不需要过渡),尤其是新建猪场,可一次性到位全部采用人工授精。

2、也可采取NN+aI+NN,第一次和第三次采用本交,可在发情早期和晚期刺激母猪接受配种(尤其是后备母猪和断奶后迟发情的经产母猪),本交有利于排卵同步化及精子在母体内的运动;在两次本交期间采用人工受精可使公猪得到充分休息(公猪数量紧张时);此法有利于提高配种率和产仔数。

五、猪场人工授精实验室工作程序

1、程序一:打开电源(预热)―摇匀贮精―(检查贮精质量)―配制稀释液和预热―采精前准备―采精―原精处理(活力、密度等)―稀释―包装―冷却―贮存

2、程序二:打开电源(预热)―摇匀贮精―(检查贮精质量)―配制稀释液和预热―采精前准备―采精―等量稀释―(等价)原精处理(活力、密度等)--再稀释―包装―冷却―贮存

六、打开实验室里需要预热的电器

1、空调(21―23℃);

2、显微镜;

3、恒温载物台:并同时预热载玻片、盖玻片(37 ℃ )(载玻片、盖玻片可在干燥恒温箱或自制预热箱中预热);

4、精子密度分光光度仪(精子密度光电比色计);

5、电子称(0.5g―2kg);

6、恒温磁力搅拌器;

7、恒温水浴锅(36℃):实际可操作在(37―38℃)或(38―39 ℃)(注意冬夏季节区别以及操作顺序不同而引起的差别);

8、干燥恒温箱(38―39℃)或自制预热箱;

9、预热橱(内置一个干湿温度计)(也就是“传递窗”)(长宽高=30×40×40cm)(内悬挂100瓦灯泡或菲利谱乳猪保温灯皆可)。

七、摇匀恒温冰箱中储藏的精液

1、轻柔转动或摇动贮存在恒温冰箱中的精液瓶或精液袋,使之悬浮均匀(2次/天=早晚),防止营养物质发生沉淀,而影响精子的保存期;

2、清点并记录贮存在恒温冰箱中的精液种类和数目;

3、同时检查贮存精液的恒温冰箱是否处于17 ℃或18 ℃或17―18℃恒温状态下。 

八、检查储存在恒温冰箱中的精液的质量

1、将待检精液滴于预热过(37℃或37--38 ℃ )的载玻片上,盖上预热过(37℃或37--38 ℃ )的盖玻片,置于预热过(37℃或37--38 ℃ )的载物台上,1―3min后即可观察;

2、在400×显微镜下(目镜10 × ,物镜40 × )(也可用100 × )评估贮精质量,要求:活力≥60%;形态异常率≤15%(不能超过20%);死精率≤20%,并作记录;

3、此步检查可省,可在贮存的精液使用时/前检查。

九、配制稀释液的顺序:

1、根据配种员自身经验、本周配种计划、昨天的配种情况、今天的推测、公猪使用记录等来决定稀释液的配制计划(估计蒸馏水或稀释液的用量);

2、根据个人操作习惯,有两种操作顺序可供选择:

a、称量蒸馏水―预热(水浴锅) ―稀释―搅拌(用手摇晃或用恒温磁力搅拌器)--预热(水浴锅)

b、称量蒸馏水―稀释―搅拌(用手摇晃或用恒温磁力搅拌器)--预热 

3、使用恒温磁力搅拌器搅拌配制的稀释液时,把转速调到5―7级搅拌10―15分钟即可。

十、配制稀释液时应注意的事项

1、稀释液应在配制好0.5―24h之间使用(30min前不可用,最好60min后使用,超过24h丢弃);

2、配制好的稀释液未用完要存于2―8℃的冰箱中;

3、稀释剂要用干净的双蒸馏水稀释;

4、稀释液要完全淹没在恒温水浴锅内的水中,并盖住水浴锅盖子,水浴锅控制的温度应在36℃或37―38℃或38--39 ℃ (注意冬夏季节的差别以及操作顺序不同而引起的差别);

5、双蒸馏水夏季可保存15天,冬天可保存30天,超期不要用;

6、制得的双蒸馏水盛放在干净的大玻璃水瓶或盛矿泉水的大塑料瓶内以作备用;

7、稀释剂与双蒸馏水配制比例是固定的,不可任意改变,若稀释剂较多,即稀释液浓度变大,那么稀释后的精液中的精子内外渗透压不等,会使精子向外渗水,导致活力降低甚至死亡;反之,向精子内渗水,同样精子活力降低甚至死亡。一般情况下,一袋稀释剂:蒸馏水==1:1(50g:1000ml)或一袋稀释剂:蒸馏水==1:1(25g:500ml),注意卡苏公司的稀释剂(47g/袋:1000ml水);

8、为防止微生物污染或为了杀死精液中被污染的微生物,可在稀释液中加入抗菌素,如“双抗”(1000ml稀释液中可加入青霉素40万IU,链霉素20万IU);

9、一旦稀释液中加入了抗菌素,此稀释液放置不要超过24h;

10、抗菌素水平下降很快,当天使用须重新加抗菌素(主要针对往日存放的稀释液);

11、在稀释液中可以添加催产素,有助于提高母猪受胎率和产仔数(5IU催产素:1000ml稀释液);

12、特殊情况下:新鲜精液现采现用(不能贮用),可用(经过恒温水浴锅预热过的)等渗的GS液(5%)或等渗的GS(5%)盐(0.9%)水。

十一、定期清洗双蒸馏水器

为了提高从双蒸馏水器出来的蒸馏水质量、制取蒸馏水的速度、蒸馏水器的安全与寿命等,建议定期对双蒸馏水器进行清洗。每次清洗使用98%盐酸10ml或使用36%盐酸量大一些。

十二、精液稀释剂的种类:

1、稀释剂分三类:

a、短效稀释剂:一般呈弱碱性,保存1―3天

b、中效稀释剂:一般呈中性,保存3―5天

c、长效稀释剂:一般呈弱酸性,保存5―8天

2、稀释剂原理:

弱酸性环境抑制精子活动,弱碱性环境促进精子活动,所以稀释液要求弱酸性才能抑制精子活动,延长精子寿命(一般稀释剂中常加有酸性物质如柠檬酸等);

3、正常精液的pH一般为6.8―7.8,呈中性或弱碱性。

十三、市场上常见的稀释剂

1、法国卡苏公司(IMV)稀释剂

质量最好,但溶解性很差(需磁力搅拌器搅拌或用玻璃棒人工搅拌,也可简单用手不断摇晃),保存精液可达3―5天。

2、丹麦授权台湾生产的稀释剂

质量可以,但溶解性很好,不需搅拌即可溶解,保存精液可达1―3天,在生产实际操作方面,为了保证生产成绩,一般超过2天不再使用。

3、其它国内外生产的稀释剂等。

十四、保存稀释剂应注意的事项

1、稀释剂平时要放在低温冰箱中(2―8℃);

2、配制前提前放到室温(实验室)使其升温到室温(20―25℃);

3、尤其是夏季炎热高温,一定要注意稀释剂的存放。

十五、采精前的准备工作

1、采精杯(有专售或用喝水的)提前准备好预热(用干燥恒温箱或自制预热箱进行预热),最好同时制备两个采精杯备用;

2、采精杯的制备:先在保温杯内衬一个一次性采精袋,再在杯口覆四层脱脂纱布或两层滤纸,用橡皮筋固定在杯边缘上,要松紧合适,使其能沉入2cm左右,制好后放在38--39℃恒温干燥箱或自制预热箱里进行采精前预热;

3、运输保温箱(可插电源进行预热的运输保温箱或自带蓄电池的恒温保温箱)或泡沫保温箱(良好的保温性,壁厚至少2cm)打开盖放在空调底下预热(若条件允许,每天下班之前把保温箱放在空调开着的实验室内进行提前3―5h的预热);

4、各种塑料杯(3L)、玻璃杯及采精杯(1L)等的重量(包括带的塑料袋)(用标签贴到杯上,以后可以定期复称);

5、用于在精液稀释时盛装稀释液或精液的塑料杯或玻璃杯提前预热(在干燥恒温箱或自制预热箱内)。

十六、采精操作过程

1、将预热好的采精杯从恒温干燥箱中或自制预热箱中取出,放到提前预热过的预热橱(悬挂100瓦灯泡或160瓦乳猪保温灯)中备用;

2、在采精之前先剪去公猪包皮上的被毛(可省),防止干扰采精及细菌污染;

3、将待采精公猪赶至采精栏,用0.1%KMnO4溶液清洗其腹部及包皮,再用清水洗净,用干净毛巾擦干;

4、挤出包皮积尿,按摩公猪的包皮部刺激并引导公猪,待公猪爬上假台猪后,用温暖清洁的手(有无手套皆可)握紧伸出的龟头,顺公猪前冲时将阴茎的“S”状弯曲拉直,握紧阴茎螺旋部的第一和第二褶,在公猪前冲时允许阴茎自然伸展,不能强拉。充分伸展后,阴茎将停止推进,达到强直、“锁定”状态,开始射精。射精过程中不要松手,否则压力减轻将导致射精中断;

5、收集浓份(经验不足稀稠全收集)精液,直至公猪射精完毕时才放手,注意在收集精液过程中防止包皮部液体等进入采精杯[伸拉阴茎呈一定的弯曲度(近似水平方向)];

6、采集完精液后,迅速将盛装原精液的采精杯迅速放入预热橱内,交给实验室内人迅速处理原精(若条件不具备,也可迅速放入恒温水浴锅内或恒温干燥箱内待检;若有杯盖更好,去掉纱布或滤纸,迅速盖上盖子);

7、若人手不够,下班之前或精液采完稀释后再彻底冲清采精栏(若人手足够,应及时清洗采精栏,否则干燥后的精液胶体很难去除);

8、采精频率:成年公猪每周1--2次,青年公猪每周1次(1岁前),最好能固定每头公猪的采精频率和采精习惯(间隔一定天数或固定周“号”)。

十七、采精过程中应该注意的事项

1、采精过程中,公猪停止射精时,不要轻易停止采精即松手,因公猪在整个射精过程中一般会有2―3次等间歇(停止射精);

2、间歇时要不断刺激阴茎龟头或四指不断松紧刺激阴茎;

3、在采精过程中不要碰阴茎体,否则阴茎将迅速缩回;

4、采精结束之后,不要急于去掉纱布或滤纸,尤其是冬季(进入实验室后再摘掉;若有杯盖,可以去掉);

5、采精过程中,整个阴茎要偏离公猪身体的方向,以免采精过程中尿液或污物污染。

十八、传递窗的规格和作用

1、一般猪场在设计人工授精实验室与采精室(或采精栏)时是相邻的,设计合适的实验室与采精室之间必定存在传递窗;

2、传递窗类似“壁橱”样式,合格的传递窗不仅具有传递采精杯的作用,还具有保温预热采精杯的作用。一般猪场老板在管理方面会在人工授精实验室和公猪舍安排一个人,这样预热橱就显得重要了,否则影响采精前采精杯的保温和采精后精液的保温;如果安排两个人,预热橱就可省略;

3、传递窗大小一般设计规格为长宽高=30×40×40cm;传递窗两边设计有推拉窗(可以左右推拉关开);传递窗下边沿离地面高100--120cm即可;

4、传递窗上面悬挂100瓦灯泡或100瓦菲利谱乳猪保温灯用于预热保温。

十九、原精处理

去掉罩在采精杯上的滤纸和粘液(胶体和副性腺),注意避免杂物掉入精液中;对采来的精液处理,不同的人有不同的操作处理顺序,当然这取决于个人习惯、操作熟练程度、对公猪精液历史的了解等因素来决定。

1、先检测后稀释:

a、插入干净的温度计测量原精液温度并作记录;

b、用100×显微镜镜检精子活力(也可用400 × ),活力低于3分弃之;

c、用分光光度计检测精子密度,对照密度转换表记录对应的密度值;

d、用电子称称量原精重量==原精体积,并作记录;

e、计算需要稀释的头份和所需的稀释液;

2、先稀释后检测(对公猪精液了解的条件下)

a、称量原精重量==原精体积,并作记录;

b、先对原精等量稀释,以后当作原精对待按上述“先检测后稀释”步骤进行操作。

二十、精液处理应该注意的事项

1、记录精液情况(体积、密度、活力等);

2、根据平时对每头公猪的了解,可以决定对其所采的精液处理顺序如精液稀释、活力测定、密度测定等顺序;

3、稀释时用玻璃棒导流;

4、稀释过程中精液搅拌(速度、方向等)(整个过程中最好进行2次搅拌);

5、稀释后精液应有一段缓冲时间(让精子与稀释液充分相互渗透均匀),不要急于分装(稀释后放置10min左右再分装);

6、分装后的精液要横躺在有毛巾铺的桌上,缓慢冷却1―2h(否则用几层干燥毛巾包裹着放进恒温箱内),不要急于放到恒温冰箱内;

7、稀释后的精液尽量减少与空气的接触量(输精瓶捏扁后盖上盖子);

8、稀释时将预热过的稀释液盛放入预热过的合适的塑料杯或玻璃杯内,然后右手端着盛着稀释液的塑料杯或玻璃杯,左手拿着玻璃棒用于导流,玻璃棒下部接触着杯壁,接着缓慢将稀释液沿着杯壁倒入精液中(稀释过程中最好停顿2次对所稀释的精液进行搅拌);

9、一定要控制稀释液与精液的温差,最好在1℃之内,但要注意:只可调整稀释液温度,任何情况下都不得调整精液温度,将调温后的稀释液沿杯壁缓慢注入原精液中;

10、稀释前中后尽量减少精液的转移和震动;

11、稀释后的精液密度不能过大,否则稀释剂中的营养物质不能提供众多精子的需要,也就是说精液不能保存时间过长,即精液保存不能达到稀释剂规定的天数;

12、精液包装一般在30―40亿精子/头份(至少20亿精子/头份;至多45亿精子/头份);输精体积一般在80―100ml/头份,至少70ml/头份。

二十一、原精活力的评估(5分制)

0分:视野中无精子或精子全部死亡;

1分:无直线运动,包括只做头部或尾部运动及原地转动的精子;

2分:运动速度缓慢,轨迹不规则,或仅做转圈运动;

3分:不明显的直线运动轨迹,运动速度缓慢,精子粘在一起;

4分:呈明显的直线运动轨迹,运动速度较快,有少部分精子粘在一起;

5分:尾部呈鞭状快速摆动,呈明显的直线运动轨迹;

以上评估方法仅是经验的简单描述,最主要的是要求操作人员要有一定的人工授精操作经验,否则没有以前的经验参照,可能会造成判断不准;眼观判断以后,要求精子活力达到3分(包括3分)以上才可稀释处理包装使用。

二十二、根据精液色泽来估计原精液的密度

1、若呈水样,说明含精子很少(<1亿/ml);

2、若呈乳白色,说明浓度正常,含精子2―4亿/ml;

3、若呈深乳白色,说明浓度很浓,可达4―6亿/ml,此精液呈云雾状;

4、若呈粉红色至红色,说明精液中含血,应弃之,让公猪休息3―6W后,可试着采精(料中多加些矿物质、多维等进行治疗);

5、若呈黄色至绿色,说明精液中混有包皮液(尿液和细菌等),应弃之;

6、若呈淡绿色,说明精液中可能混有脓液,精液应弃之。让公猪休息2―3周后,可试着采精(料中添加长效广谱抗生素治疗和多加些电解多维保健促愈);

7、精液中不能有毛发、尘土或其他污染物(宏观),若显微镜下发现精液中有凝固和成块物质(微观),并且精子凝聚其上,说明公猪生殖系统可能有炎症,精液应弃之。

二十三、精液的精子密度测定方法

1、血细胞计数法:较准确、成本低、但费工费时、效率低,不切实际;

2、分光光度计:准确、快速、方便、但成本高;

原理:用精子对光通透力差为依据;光度计确定精子密度,其结果比实际值偏高,因该方法将精液中的细胞碎屑等非精子都视为精子计算了,误差为5―8%;

3、显微镜估测法:准确性差但要求员工经验性强(主观经验)

根据显微镜观察精液密度大小,来量取稀释液稀释;先小量稀释,稀释后再用观察其密度大小,若密度还大,再酌情稀释,根据自身经验直到满意为止(若无准确精液密度,稀释比例一般在1:4―10,至少1:4;不要超过1:10)。

二十四、精液密度显微镜估测法

估测是检测精液密度常用的一种方法,常与活力检测同步进行,根据视野中精子分布情况和稠密来分“密、中、稀”三个等级;经验丰富的工作人员(在无精液密度计条件下)可以采用精液密度显微镜估测法 。

密:整个视野中布满精子,相临精子之间的空隙小于一个精子长度,看不清各个精子的活动,“密”级精液含有精子约6亿/ml以上;

中:视野中精子较多,可见各个精子活动,相临精子之间的间隙在1-2个精子长度间,“中”级精液含有精子约3--4亿/ml;。

稀:视野中精子很稀少,相临精子之间的间隙在2个精子长度以上,“稀”级精液含有精子约2亿/ml以下。

二十五、精液稀释前后应该检测的项目

1、 原精应检测的项目:气味(干净的精液只有一点气味或无味,受包皮液污染的精液气味很大)、 体积、数量(密度)、 活力、 形态(正常精子与畸形精子)

2、原精稀释后应检测的项目: 活力(稀释后活力、贮存后活力、混合精液的活力)。

二十六、精子畸形率的测定

1、精液中精子畸形率要求≤15%或18%;

2、用普通显微镜测定,需对精子染色(伊红或姬姆萨)(对所有精子都上色,染色只是为了观察的清晰);

3、用相差显微镜可直接观察精子的畸形率;

4、对公猪精液中精子畸形率的测定每月一次(对新公猪最初几次都要进行精子畸形率检查);

5、尤其夏秋季(夏季高温对精液的危害长达2个月之久),注意公猪精液的质量的保证,定期检查精液质量(每2周一次);

6、取稀释后的精液一滴于载玻片上,用载玻片沿着一侧慢慢抹成薄薄的一层,然后晾干(自然状态)或炕干,滴一滴稀释后的伊红或姬姆萨(不用抹平)即可观察(正常或畸形精子全部上色,染色只是为了观察的清晰,通过目镜整个视野可能就几十个精子,因为抹成薄薄一层所导致的,这样做还是为了清晰);

二十七、正常精子的构造和功能

头部:含有蛋白质和遗传物质,决定着精子的受精能力

中段:为头尾的连接枢纽,对精子的运动类型起着调制性

尾部:对精子的运动类型非常重要(控制/左右精子的运动类型)

二十八、畸形精子的种类

1、头部畸形的精子:不对称、尖塔形、锥形、皱缩、小头、大头、长头、双头等

2、中段畸形的精子:折弯、肿胀、缺损、螺旋、双重段等

3、尾部畸形的精子:螺旋、卷尾、双尾、折弯、无尾等

4、顶体畸形的精子:不完整、膨胀、皱缩等

5、原生质滴的精子:携带原生质滴者

二十九、精子原生质滴的解说

1、原生质滴也叫细胞质滴,是精子在发育/生过程中残余的原生质;

2、原生质滴的出现和消失是判别精子是否成熟的依据,原生质滴距精子头部越远,精子的受精能力可能就越强;

3、精子带着原生质滴,标志着精子尚未成熟到具有使卵子受精的能力。精子在其头尾结合部(中段)带着一个原生质滴进入附睾,精子在附睾内成熟期间,该原生质滴会向尾部远端移动,最终在尾部的中段附近脱落;

4、精子成熟后就贮存在附睾内直到射精时被射出,若精子若未被射出,就会在附睾内被分解吸收(自吸);

5、若成年公猪射精中20%以上的精子含有原生质滴,意味着公猪可能使用过度,说明射出的成熟精子快于精子的成熟更新过程;若青年公猪射出的精子含有许多原生质滴的精子,说明此公猪还没有达到性成熟。

三十、精子顶体的解说

1、顶体为一囊状结构,在精子的头部,覆盖精子头部80%;顶体在受精过程中有着重要作用;

2、顶体中含有一种酶,其可溶解卵细胞壁,从而进入卵子内发生受精;若顶体遭到破坏,就会抑制精子的获能和受精。

三十一、精液稀释的原因

1、 增大体积以提高其利用率;

2、为精子提供一个有利于保存的环境;

三十二、精液包装操作

1、将稀释好的精液放置在一定的高度(可以把高度大约为60cm的板凳放在桌子上,而把盛着精液的杯子放置在板凳上);

2、用吸耳球将稀释过的精液吸入虹吸导管(黄色软皮管,外直径约1cm,大约1m即可),并弃掉开始部分精液(虹吸导管一头放进稀释过的精液中;另一头被夹带一个小木夹子或小铁夹子,方便控制虹吸导管中的精液流动);

3、当然也可直接倒入输精瓶内,若为输精袋,必须按上述方式[使用输精袋必须有压膜机或半自动分装机(与压膜机、电源等连为一体)];

4、分装要缓慢,达到每瓶所需的精液量;

5、在瓶上作好标记(公猪代号、采精日期等)。

三十三、精液冷却过程中应该注意的事项

1、贮存之前:

输精瓶内的精液必须先冷却到室温(21―23℃),严禁分装后未冷却直接放进恒温冰箱内(17℃或18 ℃或17―18℃);

2、冷却时间:

在室温21―23 ℃条件下大约1―2h;对于经验不足者,可以插入干净的温度计实测来控制;严禁已冷却到室温的精液长时间放置在实验室桌子上;

3、冷却场所:

人工授精实验室即21―23℃室温,放在干燥并干净的且底下铺着两层干燥毛巾的桌子上(桌子可为木桌子或水泥板桌子)。

三十四、精液贮存过程中温度的重要性

1、精液贮存要用专用精液贮存恒温冰箱;

2、精液贮存在17 ℃或18 ℃或17―18℃恒温状态下(此温度下精子的新陈代谢水平降低,将会消耗较少的营养物质及产生较少的废物,从而延长精子的寿命);

3、严禁≤15℃(低于此温度将会损害精子,因猪的精子比其他动物的精子对于低温更为敏感);

4、严禁≥20℃(高于此温度会加速精子的新陈代谢水平,导致精子衰竭,缩短精子的寿命);

可见,密切注意并控制精液贮存期间的温度变化对于维持精子的活力和寿命是多么重要!

三十五、恒温冰箱在保存精液过程中应该注意的事项

1、恒温冰箱温度要恒定,每天注意看一下冰箱外在显示器显示的温度和冰箱内的温度计(额外添加,与冰箱外在温度显示器相互监督对照)显示的温度差异情况(最好作一下记录),建议每天检查2次(早晚),并在恒温冰箱贮存表上作下记录;

2、实验室人员每天需对恒温冰箱中的贮精进行盘存(每天早晚两次,至少一次),并作好盘存记录表;保证精液先进先出的原则,过期的精液应弃掉或做它用;

2、恒温冰箱内要放一些冰快(最好为商业冰快),以防停电等特殊情况;

3、精液在冰箱内要横躺着,最多不要超过三层;

4、恒温冰箱内贮存的精液应每天翻转2次(早晚);

5、冰箱内严禁存放其它不必要的东西,尤其是食品和肉类等。

三十六、人工授精实验室需详细记录的表格

1、公猪采精记录表(个体公猪记录表)[采精日期、采精员姓名、公猪耳号、采精量、密度、活力、畸形率、备注(公猪健康状况和性欲等)];

2、公猪采精记录汇总表(每一天所有公猪采精记录情况);

3、公猪采精记录卡(挂在公猪栏/圈上方的铁丝上);

4、公猪采精分配表[每一头公猪的采精周期或按公猪间隔一定的天数采精(如某一头公猪固定在5、10、15、20、25、30号或3、7、11、15、19、23、27号采精)]。

三十七、精液处理完后实验室整理

1、关闭那些应该关的仪器电源;

2、清理摆放好桌子上的用具和仪器,如显微镜不用时用袋子套上以防灰尘等;

3、清洗采精、处理、稀释、包装等整个过程中使用过的用具和仪器,再用双蒸馏水清涮和过滤;

4、把清洗和过滤过的用具和仪器放置在应该放的位置;

5、显微镜镜头(目镜和物镜)定期用二甲苯浸泡,以保持清洁(2―4周一次);

6、注意避免用于精液配制的用具与清洗剂的接触;

7、清理水槽中的废物、废液等;

8、清理垃圾斗中的垃圾;

9、清理和打扫实验室地面的卫生,保持干燥等等;

三十八、精液运输箱的选择

1、运输箱选择的前提:

a、应该选择一个能够在整个运输过程中维持精液温度的运输箱;

b、运输箱的选择要考虑运输过程中的温度变化和运输的时间(尤其是夏季和冬季)。

2、运输箱种类

a、长途运输箱:泡沫箱;

b、短途运输箱:精液保温箱、恒温保温箱(带电池);

三十九、精液包装运输应该注意的事项(长途外售)

1、包装材料:

a、泡沫保温箱:良好的保温性,壁厚至少2cm,规格为25×25×15cm(市售);

b、低温冰袋:长效,温度变花缓慢(市售);

c、封箱胶带:宽(5cm左右)而透明的胶带(市售);

2、包装前准备:

a、将所需泡沫保温箱和低温冰袋放入20℃环境中(最低不能低于17 ℃ ),不少于5h;

b、需运输外售的精液置于内保存至少3h;

3、精液包装:

a、无论袋装或瓶装精液都需平铺叠放,袋装精液,四层放一层冰袋;瓶装精液,两层放一层冰袋。(若泡沫箱未装满,可用块状泡沫压实,以免运输颠簸致使精液瓶/袋混乱且精液受到震动);

b、盖上盖子,用胶带将箱体的缝隙密封好;

c、填写精液信息卡[精液种类、数量、类型(袋装或瓶装)、采精时间、包装时间、准备人姓名等]并将其贴于箱盖上,用透明胶带盖住;

d、箱盖子上正规写好收货人的姓名及联系电话。

四十、输精前准备工作

1、人工授精前,员工要分工明确(最好形成固定规律);

2、把输精的器具带齐,如输精管、剪子、润滑剂、卫生纸等,放到一个干净的纸箱内或工具箱内;

3、精液(往日的精液使用前活力要测定)最好放到已经预热过的保温箱内(尤其秋冬季)(在冬季可以考虑在保温箱底部放19―20℃左右的盛暖水的葡萄糖瓶,与精液用适厚毛巾隔离,精液放在上面,并用毛巾盖住);

4、母猪阴户要用0.1%KMnO4水擦洗,并用卫生纸擦干(从里到外),若母猪阴户较干净,可直接用卫生纸擦净即可。

四十一、输精时注意的事项

1、精液从17或18℃或17--18 ℃冰箱中取出或从精液保温箱中取出后不需升温,直接用于输精;

2、输精管的选择:经产母猪使用大海绵头输精管(经产母猪专用),后备母猪使用细尖海绵头输精管(后备母猪专用),输精前需检查海绵头是否松动;

3、每两次输精之间的时间间隔至少为8--12小时;

4、输精过程中出现拉尿情况要及时更换一条输精管,母猪拉粪时不准继续再向生殖道内推进输精管;

5、三次输精后8--12小时仍出现稳定发情的个别母猪可多加一次人工授精;

6、从保温箱中每拿出一头份精液后,要马上盖严保温箱;

7、不要在输精前对输精瓶底部戳孔(尤其是在冬季),这样不利于特殊情况下的输精;

8、在冬季给输精瓶自缝一个“手套”(若配种室温度适可的条件下,可省);

9、在春、夏季节尽量让母猪把精液自吸进去,在秋、冬季节尽量给母猪输精瓶或输精袋施加一定的衡压, 尽量缩短精液在外界停留的时间;

10、在输精时尽量让母猪保持稳静,人要跟着母猪动,一定不能让母猪跟着人动,这就要求输精员尽量不要乱动而改换姿势;

11、在输精前要尽量排净输精管内的空气,以免输精完后精液倒流;

12、等待输精的上一头母猪不要提前与公猪见面,以免到输精的时候静立反射不明显及不利于精液的快速吸收;

13、输精时最好有公猪的存在(前面或隔栏);

14、输精最好放在大栏内进行,不要在限位栏内进行;

15、对每一头授精母猪的两次输精间隔的8―12小时过程,最好隔离开公母猪;

16、涂抹润滑剂时,注意不要堵塞输精管孔(特殊情况下可用精液涂抹润滑);

17、插输精管时,前15cm左右要与水平面大约呈45度角斜向上插,然后平行插入,锁在子宫颈皱褶内;

18、输精结束后,让输精管停留在阴道内大约3―5分钟左右,不要急于拔下,否则精液易倒流;

19、要轻拔输精管并斜向下与水平面呈45角,否则容易导致精液倒/回流。

四十二、输精时选择输精管和输精瓶应该注意的事项

1、输精瓶最好具有一定的弹性和韧性,不要太柔软(瓶壁薄),那样不利于输精操作;

2、要注意输精管海绵头粘的牢不牢,不牢固的则容易脱落到母猪子宫内;

3、要注意海绵头内塑料细管的长度,若偏长,则海绵头坚硬,容易划伤母猪阴道和子宫颈口黏膜,若偏短,则海绵头太软不易插入或难以输精;

4、要注意输精管细管一定要具有弹性和韧性,不能太坚硬或太柔软,否则容易损伤阴道及子宫颈口黏膜或打折皱不利于输精。

四十三、输精时配种员的姿势和动作

1、骑在猪背上(个高),一手拿着输精瓶或输精袋,一手刺激母猪的阴户;

2、腋窝压在猪背上(个低),腋窝压在猪背上的手拿着输精瓶或输精袋,另一手刺激母猪的阴户或乳房;

3、一手压着猪背,一手拿着输精瓶或输精袋;

4、替代物(自动输精背带),操作麻烦,不太方便操作,绝大多数猪场不用。

四十四、母猪的最优配种程序

1、最优的配种程序(检查发情2次/天)

(公猪刺激时)站立发情    第1次配种   第2次配种   

a、经产母猪

第1天早上 第1天下午 第2天下午   

第1天下午 第2天早上 第3天早上   

提示:发现站立发情,推迟8--12h配种;配种之间间隔24h

(公猪刺激时)站立发情 第1次配种 第2次配种 第3次配种

b、经产母猪

第1天早上 第1天下午 第2天上午 第2天下午

第1天下午 第2天早上 第2天下午 第3天早上

提示:发现站立发情,推迟8--12h配种;配种之间间隔8--12h

(公猪刺激时)站立发情    第1次配种   第2次配种

c、后备母猪

第1天早上 第1天下午 第2天早上   

第1天下午 第2天早上 第2天下午   

提示:发现站立发情,推迟8--12h配种;配种之间间隔8--12h

(公猪刺激时)站立发情 第1次配种 第2次配种 第3次配种

d、后备母猪

第1天早上第1天下午 第2天早上 第2天下午

第1天下午第2天早上 第2天下午 第3天早上

提示:发现站立发情,推迟8--12h配种;配种之间间隔8--12h

2、最优的配种程序(检查发情1次/天):

(公猪刺激时)站立发情   第1次配种  第2次配种

a、经产母猪

第1天早上  第1天早上  第2天早上

第1天下午  第1天下午  第2天下午  

提示:发现站立发情,立即配种;配种之间间隔24h

(公猪刺激时)站发情 第1次配种 第2次配种 第3次配种

b、经产母猪

第1天早上 第1天早上 第2天早上 第3天早上

第1天下午 第1天下午 第2天下午 第3天下午

提示:发现站立发情,立即配种;配种之间间隔24h

(公猪刺激时)站发情   第1次配种  第2次配种

c、后备母猪

第1天早上  第1天早上  第1天下午  

第1天下午  第1天下午  第2天早上  

提示:发现站立发情,立即配种;配种之间间隔8―12h

(公猪刺激时)站发情 第1次配种 第2次配种 第3次配种

d、后备母猪

第1天早上 第1天早上 第1天下午 第2天早上

第1天下午 第1天下午  第2天早上 第2天下午

提示:发现站立发情,立即配种;配种之间间隔8―12h

3、傻瓜式配种程序(检查发情2次/天):

(公猪刺激时)站发情 第1次配种 第2次配种 第3次配种

a、经产母猪

第1天早上 第1天早上 第1天下午 第2天早上

第1天下午  第1天下午 第2天早上 第2天下午

提示:发现站立发情,立即配种;配种之间间隔8--12h

b、后备母猪

第1天早上 第1天早上 第1天下午 第2天早上

第1天下午  第1天下午 第2天早上 第2天下午

提示:发现站立发情,立即配种;配种之间间隔8―12h

此傻瓜式配种程序最适用、最简单,尤其是配种员在发情检查、授精方面等经验不足(规模化猪场广泛使用)。

四十五、配种次序原则(每天的发情母猪的配种先后顺序)

最先:断奶的发情母猪

其次:重复配种

再次:返情母猪

最后:后备母猪

总之,原则不变。配种次序可根据个人习惯和配种程序等灵活掌握,最终以分娩率和产仔数为准绳。

四十六、公猪精液的三级划分(等级)

一级公猪精液:公猪性欲强,精液质量优(用于发情母猪的第一次配种);

二级公猪精液:公猪性欲较强,精液质量良(用于发情母猪的第二次配种);

三级公猪精液:公猪性欲一般,精液质量一般(用于发情母猪的第三次配种);

四十七、采精栏内假母猪台的位置

1、假母猪台在采精栏里的位置要根据安全柱有无来定;

2、在有安全柱条件下,假母猪台要固定在近似采精栏中间,这样有助于保证采精人的安全;

3、在无安全柱条件下(四周围墙或漏缝铁栅栏),假母猪台要固定在采精栏的一角(采精人可以在拐角来回走动,但公猪不能),这样有助于保证采精人的安全。

四十八、人工授精实验室(精液处理室)布局

1、布局人工授精实验室原则:

a、大型的商业化人工授精站实验室或猪场内部小型的人工授精实验室,都要按最高的卫生标准来维护和使用人工授精实验室及其各种设备和仪器;

b、实验室内原则要求布局基本合理(干区域、分装区域、湿区域);

c、各仪器局部布局以操作员操作方便为准绳;

2、实验室划分三大区域:

干区域:显微镜、恒温载物台、精子密度计等;

湿区域:恒温水浴锅、电子称、磁力搅拌器、双蒸馏水器、连接着水管/水池等;

分装区域:装瓶、分装机、冷却、包装等;

3、实验室面积:

a、高档次大型人工授精站实验室长宽=680×480cm足以,实验室当中内置(可移动)一张大木桌子,其长宽高=240cm×120cm×80cm,主要用于冷却精液和外售精液包装等使用;

b、实用性人工授精站实验室长宽=400cm×400cm或530cm×300cm即可;

c、猪场内小型人工授精实验室:长宽=350×250cm即可

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