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猪流行性腹泻的系统诊断方法

来源:互联网 2016-09-13 16:09:38| 查看:

  猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的一种急性接触性肠道传染病,以水泻、呕吐和脱水为特征。我国于20世纪80年代初开始陆续有该病的流行,其中有30%~40%的病例与猪传染性胃肠炎(TGE)混合感染;2010年10月,东南亚多国出现新生仔猪病毒性腹泻,并波及我国南方10多个养猪大省,死亡仔猪超过100万头;2011年12月中旬起,该病在华东地区多家规模化猪场再次暴发;美国自2013年首次暴发此病后,2014年4月再次暴发且疫情迅速蔓延至墨西哥等国家。近年来,该病已呈世界性分布,给养猪业造成了巨大的经济损失。
 

  一、诊断方法
 

   根据流行特点、临床症状和鉴别诊断做出初步判定,再进行病原学、血清学检测,结合PCR技术确定病原体。  
 

  1.流行特点。PED常年均可发生,以冬春季发病为重,我国多于每年11月至翌年4月流行此病。各种年龄的猪均易感,尤以哺乳仔猪最易感且病死率高。其中,哺乳仔猪、保育猪或育肥猪的发病率可达100%,母猪发病率15%~90%;7日龄以内仔猪越小,症状越重,发生腹泻后2~4天脱水死亡,死亡率高达70%~100%,7日龄以上仔猪持续3~4天腹泻后可能会死于脱水,死亡率为50%~90%;育肥猪死亡率为1%~3%;成年猪感染后一般经4~5天即可康复。
 

   病猪是主要传染源,感染途径主要是粪—口途径。病毒存在于肠绒毛和肠系膜淋巴结中,随粪便排出后,污染饲料、饮水、衣服、鞋子、车辆及工具等而散播传染。根据感染毒株的毒力和猪的敏感程度不同,其潜伏期为:哺乳仔猪8~36小时,保育猪和育肥猪1~3天。发病顺序一般为:育肥猪—保育猪—妊娠母猪—产房母猪和哺乳仔猪。
 

   2.临床症状。育肥猪、保育猪和母猪表现水样腹泻,粪便呈水泥浆样或黄色;保育猪消瘦,体表沾满稀粪,多扎堆取暖;产房母猪常出现乳房萎缩,奶水不足。
 

  哺乳仔猪最早出生后12小时内就出现呕吐,随后开始腹泻,粪便呈黄、棕、白等色,脱水后畏寒,多数很快死亡;耐过猪一般成为僵猪或弱仔,表现为精神沉郁、眼睛无神、皮肤无弹性、生长缓慢且消瘦。
 

   3.剖检病变。发病仔猪胃内充满未消化的乳糜,胃底黏膜可见不同程度的充血;小肠病变明显,肠管膨满扩张、肠壁透明,肠系膜充血、肠系膜淋巴结水肿;肠内充满大量黄色液体,呈水样或黏液样,有异味;肠绒毛萎缩变短,上皮细胞变性坏死和脱落;肾脏表面散布大量针尖状出血点,其他脏器无显著一致性病变;常见机理不明的背部肌肉坏死。
 

   4.鉴别诊断。主要与猪瘟、传染性胃肠炎、轮状病毒病、伪狂犬病、博卡病、仔猪白痢、仔猪黄痢、仔猪红痢、副伤寒、猪痢疾、增生性肠病、等孢球虫病引起的腹泻相区别。
 

   5.实验室诊断
 

    (1)PEDV快速诊断试纸条(初诊)。由韩国Ani-gen公司生产,操作简单,快捷。
 

    (2)直接免疫荧光法。能快速、敏感、可靠地检测出样品中的病毒抗原。荧光显微镜检查判定:在胞浆中见到特异性苹果绿色荧光为阳性,无特异性荧光为阴性。
 

    (3)RT—PCR或RT—nPCR检测。是一种快速、高度敏感、特异的诊断方法。应用外引物从病猪粪便中扩增出DNA片段,琼脂糖凝胶电泳分析为854bp的目的基因片段,可初步断定导致猪群发病的病原体中含有猪流行性腹泻病毒;进一步用内引物经嵌套式PCR扩增出的DNA片段,琼脂糖凝胶电泳分析为412bp的目的基因片段,可确定导致猪群发病的病原体为猪流行性腹泻病毒。
 

  二、防控措施
 

   1.疫苗紧急免疫。目前,我国大多数规模化猪场均采用正品的TGE-PED二联灭活疫苗进行后海穴(尾根与肛门正中的凹陷处)注射免疫(妊娠母猪产前20~30天每头接种4毫升,仔猪断奶前每头接种l毫升,25~50千克猪只每头接种2毫升,50千克以上猪只每头接种4毫升);正在推广使用哈尔滨兽医研究所生产的TGE-PED二联弱毒苗和福建省生物药品厂同中国农业大学合作开发的TGE-PED-RV三联弱毒苗。韩国和日本等国家己使用商品化的PED活苗、灭活菌、口服苗以及仔猪口服的抗PED病毒的IgY抗体。
 

   2.分类应急处理。
 

  (1)哺乳仔猪。保温、保湿:产房可使用煤炉或其他供暖设施,确保产房温度适宜(20~25℃为宜),对仔猪保育箱使用大功率灯泡或红外线灯照射提高温度(30~34℃为宜)。产房内湿度控制在40%~80%。
 

   腹腔补液:7日龄内重症仔猪一般无治疗价值,可取肠段做返饲用;7日龄及以上发病仔猪,可在5%的葡萄糖生理盐水中加入适量的抗生素(恩诺沙星等),预热至35℃左右进行腹腔注射(倒提仔猪,于倒数第2、3排乳头之间,距腹中线2~3厘米处进针,与腹壁成90度角刺入3厘米左右,刺破腹壁后感觉进针阻力消失,回抽无血液和腹腔内容物,即可注射药水),每次30~50毫升,每天2~3次。
 

   防止饥饿:当母乳不足或不愿吮乳时,可采用米汤或人工乳进行人工饲喂。
 

   隔离饲养:若条件允许,可在猪场外设置隔离舍集中人工饲养治疗四周,以切断发病仔猪在场内的传播。
 

    (2)保育猪及育肥猪。
 

  适当限饲:尽量使用湿拌料,并将饲喂量降为正常量的三分之一。
 

  防止脱水:在饮水中添加电解多维及口服补液盐,在静脉补液糖盐水中添加阿莫西林等抗生素,以提高其抵抗力并防止大肠杆菌或沙门氏菌等继发感染。
 

    (3)后备母猪、妊娠母猪及哺乳母猪的返饲。返饲即采用新发腹泻哺乳仔猪的肠管、粪便等病毒携带物通过口服方式感染母猪群,使其通过自然感染的途径产生免疫力,新生仔猪通过母乳获得特异性母源抗体而获得保护。此法在商品化疫苗使用效果不佳,不能有效防控该病暴发流行时使用。与美国、加拿大等国家在蓝耳病暴发时,使用发病猪只的血清对全群猪进行同期感染的免疫机理基本相同。
 

   返饲对象:对已经渡过隔离期,还没有纳入配种计划的后备母猪,可以进行返饲;60~95天的妊娠母猪,可以进行返饲,使其在分娩前产生免疫力。怀孕60天以内的母猪,返饲易出现流产。怀孕95天以后的母猪,返饲会使母猪进入产房后仍处于排毒期,导致仔猪一出生就感染病毒;哺乳母猪,需等到其断奶后再进行返饲;若返饲病料较少,应优先返饲后备猪和一胎猪,因为它们所生仔猪更易发生腹泻,死亡率也更高。
 

   病料选择:主要为新发腹泻哺乳仔猪的肠管、内容物及粪便,发病24小时内采集病料为佳;其次为返饲后出现腹泻的母猪粪便,但应由兽医判定其不含伪狂犬病毒、博卡病毒等病原时方可使用,以防其他病原扩散。
 

   病料处理:将1千克肠管用刀剁碎后,倒入2升市售生理盐水中,再加入300~500克奶粉和适量的抗生素(阿莫西林或青霉素+链霉素)制成返饲物,每天每头母猪食用1次,每次50克,连用3~5天,直至出现腹泻后停喂;产房内腹泻仔猪的粪便,应及时用卫生纸擦拭收集,尽快拌入饲料中供母猪食用,时间越短越好,最多不要超过4个小时。
 

   效果评价:种猪胎龄及免疫情况不详的猪群,以后备群及一胎猪腹泻率﹥80%为返饲有效的标志;母猪胎龄3胎以内为主,腹泻率﹥70%;母猪胎龄3胎以上为主,腹泻率﹥40%,且群中后备猪及一胎猪腹泻率﹥80%;感染过PEDV的猪场,腹泻率一般为30%左右;猪群进行过多次疫苗免疫,其腹泻率与疫苗种类和免疫效果有关,需进行综合评价。其临床症状表现为,采食返饲后一周内出现发烧、腹泻、不采食或采食量下降。
 

  注意事项:为确保返饲效果,避免病毒粒子被灭活,需注意如下六点:一是收集的病料尽量不要在阳光下照射,且需尽快处理使用;二是收集粪便时不要带猪消毒;三是返饲期间暂停饮水消毒;四是病料处理和拌食不要使用含有漂白粉等消毒剂的自来水(使用市售生理盐水);五是返饲尽可能在10天内完成,若条件允许,应将怀孕60天以下和95天以上的母猪与返饲猪群隔离,以免残留返饲物通过料槽内饮水传播病毒;六是返饲期间应在饮水或饲料中添加适量的电解多维和抗生素。
 

     还应严格落实消毒灭源及做好病尸粪污的无害化处理工作,减少人员车辆流动,提高生物安全水平等。
 

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