猪场又出现一种可引起母猪共济失调、流产或突然死亡的新疫病_猪病门诊

来源：猪业科学 2016-07-17 11:37:39| 查看：次

　　尼帕病毒病(NVD) 是由尼帕病毒引起的一种新的人畜共患病毒性疾病，于1997 年在马来西亚森美兰洲双溪尼帕城首次发现，是继疯牛病、口蹄疫、禽流感后又一引起世界各国广泛关注和恐慌的人畜共患病。生猪感染该病毒后，出现发热、呼吸困难及脑炎症状;母猪感染该病毒后表现为共济失调等神经症状，可能会导致流产或突然死亡;人感染该病毒后发生病毒性脑炎而死亡。由于其引起人感染后的高死亡率，缺乏有效的疫苗和治疗方法，因此世界动物卫生组织(OIE) 和我国农业部都将其列为生物安全4 级病原体。

　　1、概况

　　尼帕病毒病是由副黏病毒科亨尼帕病毒属(Henipavi rus) 的尼帕病毒(NiV) 引起的一种人畜共患传染病。NiV是新发现于蝙蝠的一种副黏病毒，1999 年3 月初，从Sungai Nipah 村1名脑炎患者的脑脊液中分离到了一种新的副黏病毒，并确定为该次暴发的病原，因此命名为尼帕病毒(Nipah virus)。血清学检测显示，家养动物如狗、猫、马和山羊均可感染尼帕病毒，但猪是其他家养动物的传染源。尼帕病毒可感染不同年龄的猪，从1998 年马来西亚暴发尼帕病毒病以来，已造成许多人和猪伤亡，引起了巨大的社会恐慌，并给养猪业造成严重的经济损失。

　　2、实验室诊断技术

　　2.1 病原学检测

　　2.1.1 NiV 分离鉴定

　　NiV 能够在多种培养细胞中生长并快速增殖至较高的滴度。非洲绿猴肾细胞和兔肾细胞RK-13 细胞系对NiV 尤为敏感。通常在病毒感染3 d 内能够观察到病毒病变效应(CPE)，但一般来说在细胞上传代2 次，每次5 d 所达到的分离效果更为稳定。经低毒量稳定传代后的病毒再次感染细胞后24 ～ 48 h，细胞出现以形成合胞体为特征的CPE，并且感染早期，合胞体中所有细胞核位于合胞体中央，而晚期则被运送至合胞体外，并聚集在其周围。由于NiV 在体外细胞培养中扩增迅速，并且能产生大量的病毒抗原，所以采用免疫荧光或免疫电镜法检测分离培养该病毒，最为方便快速。

　　2.1.2 分子诊断技术

　　NiV 的基因组全序列已被测出，研究者们可以在此基础上针对NiV 的分子诊断技术进行相应的研发。目前，已经被报道的针对NiV 的分子检测技术有2 种，分别为荧光定量RT-PCR和双重套式RT-PCR。

　　2.1.2.1 荧光定量RT-PCR

　　该方法敏感度高、特异性强，并且不需要接触活的感染性病毒，具有生物安全性的优势。其检测灵敏度可以达到 1 个空斑形成单位( PFU)，并且有被学术界普遍认可的相关引物和探针有：

　　5′-TCAGCAGGAAGGCAAGAGAGTAA-3′(Primer1)，

　　5′-CCCCTTCATCGATATCTTGATCA-3′(Primer2)，

　　5′-6FAM-CCTCCAATGAGCACACCTCCTGCAGTAMRA-3 ′(TaqMan probe)，为NiV 的实验室快速诊断提供了技术支持。

　　2.1.2.2 双重套式RT-PCR ：

　　Wacharapluesadee 等描述了一种带有内参的双重套式RT-PCR 检测技术。该技术能够用于对果蝠尿样的检测，并且加入内参大大降低PCR 相关的抑制因素带来的假阴性的结果，提高检出准确率，在NiV 流行病学调查时大大提高NiV 监测数据的可靠性。

　　2.1.3 其他诊断技术

主要针对NiV 全病毒抗原或病毒主要致病抗原(如F 蛋白和G 蛋白等)制备特异性的病毒抗血清或单克隆抗体，在此基础上建立病毒中和试验、免疫组化以及免疫荧光等方法检测NiV相关抗原。病毒中和试验主要包括传统的空斑抑制试验、微孔板中和试验以及免疫空斑试验3种，分别通过计算空斑形成单位(PFU)、组织培养半数感染量(TCID50)以及病灶形成单位(FFU)达到检测

---养猪网手机APP端

相关阅读 疫病猪场母猪病毒呼吸困难疯牛病口蹄疫禽流感

精华推荐

蓝耳防控

推荐阅读

视觉焦点