荷兰某猪场实验验证检测唾液中蓝耳病毒和蓝耳抗体所需绳索数

来源：湖南新南方养殖服务公司 2015-05-13 10:24:55| 查看：次

中国养猪网讯：

　　引言

　　综合诊断实验室对唾液中蓝耳病的PCR 检测和ELISA抗体检测进行优化和应用。考虑到场内的实际应用，有必要在猪群里做唾液抽样，来确认其相对敏感性和特异性的流行病学。这个验证实验为猪场在蓝耳病爆发后或者小面积流行时的ELISA 检测或者PCR检测所需最少绳索数提供了依据。

　　材料与方法

　　共收集了37个猪场的101份唾液样品和1088份血清样品(这些猪场是在了解其PRRSV发病史的基础上由兽医挑选的)。从采样到送至实验室不超过48小时，共挑选唾液样品42份(表1)。

　　表1

　　血清样品用爱德士PRRSV X3试剂盒做ELISA检测抗体，实时PCR检测病毒，同时也设计了唾液优化实验草案。根据栏舍间流行(pp，有1头或者更多头PRRSV阳性小猪的栏舍数)和栏舍内流行(wpp，每个栏舍阳性小猪的数量)，决定用同一猪只血清样品的ELISA 和PCR 结果和其唾液样品的检测结果做对比。并用Stata12和Winepiscope2统计分析唾液抽样的敏感性和特异性。

　　5个猪舍，每个猪舍有10个猪栏，每个猪栏有10 头小猪，共计500头8-10周龄的断奶后小猪，预计小面积流行或是大面积流行所需的绳索数量(小面积流行：10%≤ wpp <50%，大面积流行：wpp ≥ 50%)。

　　结果

　　ELISA：10个猪场共22个栏舍中，有19个栏舍至少有1个阳性血清样品，pp为86%，其中有15个栏舍疫情大面积流行(wpp≥50%)。全部唾液样品中，有13份的ELISA 检测结果呈阳性。唾液抽样法的敏感度是68%，(CI：95%：48-89%)。有4个栏舍的栏舍内流行率低、10%≤wpp<50%，在唾液中检测不到抗体。

　　PCR：14个猪场共42个栏舍中，有21个栏舍至少有1个阳性PCR 血清样品，pp为50%(CI：95%：34%-66%)，唾液检测结果也为阳性的有15个栏舍，敏感度为71%(CI：95%：52-91%)。42个栏舍中，3个猪场的13 个栏舍疫情大面积流行(wpp≥50%)，所有唾液检测结果都为阳性，唾液抽样的敏感度为100%。

　　当所有猪舍的wpp小于50%时，敏感度是25%，(CI：95%：0-50% )。

　　在疫情大面积流行的情况下，当wpp≥50%、pp介于80-90%时，检测蓝耳抗体和病毒需要2-3根绳索。

　　当栏舍内流行在小面积到大面积流行之间时，则需要4-7根绳索。

　　当wpp小于50%时，唾液抽样法不能检测抗体或者病毒。在小面积流行的栏舍中，即使有1个栏舍的血清样品检测为阳性，混合血清样品的检测结果也是阴性的高达75%。

　　结论与讨论

　　唾液抽样法是预警蓝耳疫情爆发的有效方法，仅需2-3根绳索为其诊断提供可靠的信息。当pp和wpp减少时，检测抗体和病毒需要的绳索数就会增加。

　　基于这次试验的数据，唾液抽样法不适合用于PRRSV小面积流行。然而这些数据缺乏统计学意义。本文只收集了4个栏舍的抗体数据和8个栏舍的病毒数据(0< wpp < 50%)。因此，还需要进一步地研究在小面积流行的情况下，唾液抽样法的有效性。