（一）方案制定
 

　　试验站种猪群（种母猪、种公猪）伪狂犬病野毒感染状况的监测按种猪群（母猪）10%的比例进行采样，种公猪进行全群采样，检测与分析种猪群伪狂犬病野毒感染情况，以确定净化的具体方案。根除和净化措施分为普查，强化免疫控制、检测淘汰、全群清群与引种、监测认证与维持五个阶段。
 

　　（二）主要净化技术
 

　　世界各国养猪业通过实施伪狂犬病的净化，获得巨大的经济效益，并带动了其他疾病的净化与根除，如猪繁殖与呼吸综合征和猪支原体肺炎等。净化和根除猪伪狂犬病核心技术是基因缺失（标记）疫苗和鉴别诊断方法的研制与应用，结合生物安全措施，达到逐步建立和维持无伪狂犬病猪群。基本过程是材料准备阶段、种猪群感染率的调查、确定净化和实施方案与伪狂犬病净化场的维持。
 

　　1、疫苗与检测试剂的准备
 

　　根据猪场的前期工作基础和积累的经验，选择适合本场的伪狂犬病gE基因缺失疫苗。目前，在我国猪场中使用的基因缺失疫苗有Bartha株、HB-98株、SA215株和BUK株。现有疫苗在伪狂犬病净化中仍然发挥主导作用，即使在新发伪狂犬病的猪场，通过紧急免疫接种（包括仔猪滴鼻接种措施），仍可迅速控制该病。评价伪狂犬病疫苗的免疫效力应从体液免疫和细胞免疫两个角度评价。如果能够与实验室合作，在选择疫苗时，做疫苗免疫血清与流行毒株的交叉中和实验，依据中和效价的高低来选择疫苗最为科学合理。但是，免疫不能完全阻止感染，但可提高感染所需的病毒量，也降低感染猪向外排毒的载量。
 

　　免疫抗体检测使用gB-ELISA试剂盒，必要时可使用灭活全病毒的ELISA与中和试验。检测伪狂犬病野毒抗体使用gE-ELISA试剂盒。
 

　　2、拟净化猪群伪狂犬病野毒感染状况的调查（第一阶段）
 

　　采血抽样前，要确认种猪群至少一年内不使用全基因病毒疫苗（包括灭活苗）。首次开展此项工作的猪场，可按照种母猪群数量的10%、种公猪全群采样。分离血清，用gB-ELISA检测，根据野毒抗体阳性率高低，确定净化方案；对于此前有2年以上净化工作的猪场，采集全部种猪的样品检测gE抗体，根据检测结果，确定进入何种净化阶段。
 

　　（1）所抽检样品全部为gE的抗体阳性，则种猪群全群逐头检测。如所有血清样品均为阴性，可认为种猪群为伪狂犬病阴性，进入检测与认证阶段。
 

　　（2）如果抽检血清样品的gE抗体阳性率低于10%，可实行检测淘汰-监测与认证维持的净化方案。
 

　　（3）如果抽检血清样品的gE抗体阳性率在10%~20%，可实行强化免疫控制-检测淘汰-监测与认证维持的净化方案。
 

　　（4）如果抽检血清样品的gE抗体阳性率大于30%，则实行全群或者部分清群措施，可暂不考虑在该猪群中开展净化。如拟净化该病，只能引入或选留gE抗体阴性的后备种猪，逐步替换全部的原有猪群。
 

　　（5）当种猪群全部血清为gE抗体阴性时，可直接进入监测与认证维持阶段。
 

　　3、强化免疫控制措施（第二阶段）
 

　　主要通过用伪狂犬gE基因缺失疫苗免疫猪群，同时采取生物安全和灭鼠等综合措施，达到控制的目的。
 

　　（1）免疫程序的制定
 

　　①种母猪（种公猪）母猪每年普免3~4次；或者产前3~4周免疫一次。普免时，避免在分娩前7天内接种，以减少接种应激对分娩的影响，但可以于母猪分娩后补免，公猪每年3次免疫，采用普免方式。
 

　　②仔猪分别测定仔猪在50、60和70日龄时的伪狂犬抗体（gB抗体或全病毒抗体），每个阶段抽样30份，样品来自10窝猪、每窝3头，确保采样的均衡性。以gB抗体阳性率达85%为群体免疫合格的临界值，作为制订首免时间的参考，这个日龄免疫方式为肌肉注射。多数猪场在60~70日龄进行第1次免疫。如果产房小猪和保育猪出现伪狂犬病（如腹泻、神经症状等），建议仔猪出生后48h内采用滴鼻（或喷鼻）免疫的方式，可克服母源抗体干扰，并提高局部黏膜免疫力。当净化猪群受到伪狂犬病威胁时，仔猪需在出生后使用滴鼻（喷鼻）免疫作为首次免疫、第二次免疫。
 

　　（2）实验室评估仔猪免疫后3周，采集30份血清，检测gB或全病毒抗体、gE抗体。当gE抗体阴性时，如果85%的样品为gB抗体或全病毒抗体阳性，即可认为群体免疫合格。
 

　　（3）临床评估主要评估猪群的生产指标。母猪应无繁殖障碍；哺乳仔猪无尖叫、腹泻和转圈、死亡等现象；保育猪无神经症状；育肥猪无伪狂犬病毒引起的呼吸道症状。对伪狂犬病疑似病例需要做出排除。提供不同阶段猪群的具体生产数据。
 

　　（4）配套的生物安全体系建设
 

　　①加强检疫如需引种和留种，只能选择伪狂犬病gE抗体阴性的后备种猪。
 

　　②车辆消毒选用合适的消毒剂（如醛类和碘类消毒剂），采用科学的消毒流程[清扫、冲洗、干燥、消毒（强调药物要有足够的作用时间，一般15min）冲洗与干燥]，如可能则可采样评价伪狂犬病杀灭效果，出猪台与生产区的物理距离至少间隔50m及以上；装猪区严禁与日常办公区混合。
 

　　③外来人员隔离外出归场的工作人员，尤其是生产区的饲养人员和技术人员，需在办公区隔离2d。外来参观人员严禁进入生产区，确属必须，隔离2d后再须沐浴更衣才能进入生产区。
 

　　④病死猪无害化处理按照农业部发布的《病死动物无害化处理技术规范》（农医发[2013]34号）处理病死猪和流产死胎等；具体方案有深埋、焚烧、发酵化制法。近几年出现了锯末堆肥法、高温发酵生产有机肥等方法，可以根据实际情况选用。
 

　　⑤定期灭鼠可采用化学药物和物理机械方案，捕杀猪场内部的鼠类，并作杀灭效果评估。建议通过专业灭鼠公司开展鼠类密度调查、灭鼠药物选择、使用效果评估和定期更换药物等工作。
 

　　4、检测淘汰（第三阶段）
 

　　（1）种猪群当种猪群的伪狂犬病野毒感染抗体（gE抗体）阳性率在10%以下时，对种猪群实行逐头采样检测。如gE抗体阳性，直接淘汰感染猪；对可疑样品，可用不同批次的试剂盒再次检测；如仍为可疑，判为野毒抗体阳性直接淘汰。妊娠母猪、空怀母猪和公猪为gE抗体阳性，直接淘汰。
 

　　（2）后备种猪的检测对拟选留的后备种猪，可分别在5月龄、进入后备舍或配种前1个月检测gE抗体，如为阴性，即可作为种猪使用；如为阳性，淘汰处理。
 

　　5.全部（或部分）清群（第四阶段）
 

　　如果种猪群的伪狂犬病野毒抗体阳性率在30%以上，全部清群，重新引种；或者该猪群不能作为种猪群使用，通过加强免疫接种，作为商品猪场的繁殖猪群，最终全部淘汰该猪群。
 

　　部分清群时，加大种公、母猪逐步淘汰力度，种公猪野毒抗体阳性立即淘汰，对有流产、产死胎、产木乃伊胎等症状的种母猪100%进行检测，伪狂犬野毒抗体阳性的或生产性状表现较差的立即淘汰或断奶后淘汰；且阴性后备加大补充力度，更新率达到40%以上，逐步达到伪狂犬病净化猪群的目的。
 

　　6.监测与认证（第五阶段）
 

　　（1）伪狂犬病稳定猪场完成检测淘汰阶段1年后，根据猪场实际情况，可采取以下任一种哨兵猪方案。同时，猪群仍执行伪狂犬病基因缺失疫苗免疫策略。
 

　　①先设立育肥猪阶段哨兵猪，随后设立母猪阶段哨兵猪。
 

　　育肥阶段哨兵猪的数量为每个生产线30头猪，分散在不同的猪栏。1个月后检测，应该为野毒抗体阴性；要做3批猪重复试验，批次之间间隔1个月。随后，可从合格的育肥阶段哨兵猪中选留免疫抗体和野毒抗体均为阴性的后备母猪，作为母猪妊娠阶段哨兵猪，进入配种妊娠周期。
 

　　母猪妊娠阶段哨兵猪占母猪数量2%~3%，或最低为10头母猪。也可固定一定数量的非免疫母猪哨兵猪，循环使用。不免疫哨兵母猪分别在猪群的配种前，妊娠后40~50d、80~90d，分娩后2周分别检测野毒抗体，其后代与断奶时（3~4周龄）检测，均应该为野毒抗体阴性。公猪的伪狂犬病野毒抗体阴性，疑似病例为伪狂犬病病原阴性，生产成绩正常稳定。母猪妊娠阶段哨兵猪仅需做2批或2次产仔周期的检测。
 

　　②同时设立育肥阶段和母猪阶段的哨兵猪。对于前期基础较好的猪场，可以同时做育肥阶段和妊娠阶段的哨兵猪的监测与观察。
 

　　此阶段需要观察1年。
 

　　（2）伪狂犬病净化猪场在稳定阶段后，在1年内猪群生产成绩正常，监测全群种猪，所有种猪的野毒抗体均为阴性，即可认为是伪狂犬病阴性猪群，完成净化任务，即为伪狂犬病净化猪场。这是本病净化工作的目标。
 

　　7.伪狂犬病净化猪场的维持（第六阶段）
 

　　每隔1年，对阴性种猪群，按10%比例随机抽样，监测伪狂犬病净化猪场的维持状况。在此期间，只能引入伪狂犬病野毒抗体阴性后备种。猪或（和）伪狂犬病毒阴性的精液，配合生物安全体系建设，做好防控工作，防止伪狂犬病毒的传入。
 

　　按照国外成功的经验，完成伪狂犬病净化后，就要取消伪狂犬病免疫（包括活疫苗免疫）预防措施，尽可能减少弱毒活疫苗在猪场环境中的存在，或者是仅使用基因缺失灭活苗。鉴于我国目前伪狂犬病流行现状，而且没有在全国范围内实施净化措施，仅一些猪场净化后取消免疫预防为时过早；但是在疾病净化后期，研发和使用基因缺失灭活苗，是值得提倡的措施。
 

　　与其他疾病净化相比，猪伪狂犬病净化所需的技术手段比较成熟、采样和检测简便、方案简单可行，只要种猪场认识到其重要性，坚持实施，是能够达到预期的。