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PEDV:返饲后的免疫效应

来源:湖南新南方养殖服务公司 2015-06-09 17:19:25| 查看:

中国养猪网讯:

  前言


  猪流行性腹泻病毒(PEDV)是一种与传染性胃肠炎病毒(TGEV)相关的冠状病毒,在2013年4月在美国突然出现。具有传染性的母猪暴发疫情后可以持续传播本病,哺乳仔猪以持续数周剧烈的腹泻,呕吐和高死亡率为特点。PEDV在2014年二月出现于加拿大,尽管采取了大量措施来控制和消灭本病,但还是有报道本病在广泛爆发。在美国没有免疫PEDV疫苗的地方,研究人员已经开始用感染肠道组织的返饲来诱导免疫。然而,在各种诱导免疫的返饲报告中发现其几乎没有效果,这包括血清学效应的持续时间和粘膜抗体的产生。


  材料与方法


  通过克隆表达的PEDV衣壳蛋白和S1、S2片段的包膜糖蛋白来产生重组蛋白抗原。


  蛋白质纯化后用于来包被微量滴定板,通过ELISA来检测血清、初乳、乳、排泄物中的PEDV抗体时,应使包被封闭和检测条件达到最佳状态。通过qPCR测定返饲料中PEDV的滴度,将多倍剂量此材料饲喂
给怀孕母猪超过一周,在3周之后给予或不给予二次返饲。样品可以随时从母猪和断奶仔猪分离获得。由qPCR和抗病毒衣壳蛋白ELISA进行评估是否感染。


  结果


  PDEVELISA的检测是基于阳性猪群中的448个血清样品和阴性猪群中的280个样品。S/P的比率结果见图表1。设定临界的吸光度值为0.5时,检测的灵敏度和特异性均为0.99。


  图1 PEDVELISA确定阳性血清和阴性血清的S/P比值分布


  在母猪妊娠80天返饲一次或三周之后重复返饲,二者均在3周表现统一的血清学变化。再次返饲后并没有产生显著的效果。在一项研究报告中,返饲后的6-8周,平均抗体水平已经回归到了基准水平,并且
在10日龄猪体内几乎检测不到血清抗体。在另一项报告中,血清抗体效价水平参差不齐,仅一半的仔猪和成猪血清中含有抗PEDV抗体。


  在母猪的乳中(未收集初乳)、母猪或仔猪的粪便中无论什么时候都检测不到PEDV的IgG或IgA抗体。


  结论与讨论


  用已感染PEDV的肠道内容物来进行返饲是一种有效诱导母猪产生抗PEDV抗体反应的方法。然而,抗病毒衣壳抗体ELISA并不能证明仔猪可以获得母源免疫力,同时也不能检测到粪便中的分泌抗体。一般来说,分泌型的IgA抗体是抵抗肠道病原体感染的关键。因此,很有可能在母猪体内难以产生有效PEDV免疫反应或将此免疫力转移给仔猪,同时也有可能是抗病毒衣壳蛋白ELISA也检测不到保护效应。我们仍然
不知道哪种可能性是正确的,但是已经发现粪便中含有大量的总IgA,而且混合在粪便中的血清抗体很容易检测到。因此,检测粪便ELISA的阴性结果意味着特异性抗体是不存在的。


  总的来说,我们可以得出这样的结论:PEDV感染可以产生一个短暂的免疫反应,可能在母猪和仔猪体内不会产生坚实的保护力。

 

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