人工感染猪流行性腹泻病毒（PEDV）体液免疫应答（IgM，IgA和IgG）动力学

来源：湖南新南方养殖服务公司 2015-06-09 17:15:30| 查看：次

中国养猪网讯:

　　前言

　　自2013年年初猪流行性腹泻流行以来，该病已经严重影响了美国养猪业发展（1）。猪流行性腹泻病毒（PEDV）和猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）都是甲型冠状病毒属（Alphacoronavirus）的成员，而
TGEV是另一种重要的猪病毒性肠道病原体。这两种病毒的基因及抗原性相差较大。两种病毒的感染的临床症状和组织病理学较为相似。病原学的诊断只能依据实验室诊断。

　　阻止该病蔓延的关键是严密监视和控制被感染动物和防止污染物的流通传播。血清学诊断在该病的防控和流行病学调查方面起到了很重要的作用。通过间接ELISA、免疫荧光（IFA）检测、病毒中和试验可
以在自然发病或实验感染猪的血清中检测到抗PED的抗体。然而，PEDV抗体水平消长规律和商品化的ELISA检测结果不相符。以下研究旨在评估实验感染PEDV猪的体液免疫反应。

　　材料与方法

　　选取56头对PED，TGE和PRRS表现阴性的三周龄仔猪，用这些仔猪来灌喂分离的PEDV毒（USA/Iowa/18984/2013）。这些猪在接种后观察76天，在此期间，定期观察其临床症状，检测排泄的粪便中的
病毒以作为组织学分析。在0天及其以后每隔7天收集血清样品，通过ELISA方法测定PEDV抗体。

　　相同的PEDV分离毒株在Vero细胞上进行增殖，对其浓缩处理后，全病毒抗原作为ELISA板的准备。为了能同步检测抗PEDV的IgM，IgA和IgG抗体，ELISA条件像包被条件、试剂浓度、孵育时间、缓冲液的
组成成分应达到最优化。

　　结果

　　临床腹泻症状开始于接种后的3或4天，接种后10天腹泻开始减弱。粪便中的PEDV在接种后7天、14天、21天和28天的检出率分别为100%、88%、42%和0%。实验接种后抗PEDV的IgM、IgA和IgG抗体水
平随时间变化如图1所示。短期内，首先检测到低水平的IgM，随后会有一个高水平的IgA和中等水平的IgG。在接种后的3或4周IgA和IgG抗体含量会逐渐减少。