血清学和口腔粘液（qPCR）监控猪群内胞内劳森菌

来源：湖南新南方养殖服务公司 2015-05-27 16:53:15| 查看：次

中国养猪网讯:

　　前言

　　胞内劳森菌感染猪群监控，依据血清学和粪样中的DNA。血清学提供一种良好的评估时间和感染率，而定量实时PCR（qPCR）表明感染严重程度（1,2,3）。监控猪群健康最近使用口腔粘液，也通过病原和抗体检测。一定量的猪群使用棉绳收集口腔粘液，而不是单个动物（4）。本研究目的是，比较从口腔粘液进行qPCR扩增能力与传统血清学实验，检测胞内劳森菌感染时间和严重程度。

　　材料和方法

　　从10个断奶-育肥多重年龄组的经济猪群中（6和23周龄间每隔3-4周），采集一致的口腔粘液和血样。口腔粘液从不到40头的猪每栏中采集，2份口腔粘液从大规模的栏舍采集。使用MagMax 96 Viral RNA提取试剂盒（Biosystems 提供）提取核酸，并用TaqMan实时PCR扩增胞内劳森菌的DNA（2）。从每栏10头猪中采集血样，至少代表5%猪，用Bioscreen Enterisol Ileitis ELISA检测胞内劳森菌特异性IgG。流行率和口腔粘液内胞内劳森菌DNA含量之间简单线性关系，并用GenStat 16th edn对每栏血清抗体进行检测。

　　结果

　　检测胞内劳森菌DNA的口腔粘液：88栏舍中58栏（65.9%），152份单个口腔粘液样品中97份（63.8%），10个猪群中7个。胞内劳森菌数量范围在2.6×102到3.2×107之间，检测胞内劳森菌DNA的猪日龄
范围在12.5周龄和19周龄。

　　10个猪群中通过血清学检测胞内劳森菌的感染情况，88栏舍中有76栏（86.4%）。表明血清阳性率增加超过猪群1,3,7,8,10和12中80%的育肥猪，平均抗体浓度（表示未抑制百分比，PI）大于55。剩余猪
群中血清阳性率不超过67%，PI低于46。6个猪群中，胞内劳森菌口腔粘液和血清中抗体检测在同一时间出现。然而，剩余4个猪群，胞内劳森菌qPCR检测相对于其抗体阳性而没有出现或延迟（表1）。