2012年和2013年澳大利亚分离12株大肠杆菌毒力基因的观察分析

来源：湖南新南方养殖服务公司 2015-05-15 09:53:04| 查看：次

中国养猪网讯：

　　前言

　　大肠杆菌(E.coli)是已知能引起猪群的发病，仍在世界范围内为哺乳仔猪和断奶后仔猪最重要疾病之一(1)。以前报道实时PCR用于鉴定大肠杆菌毒力基因(VG)：毒素，菌毛和粘附因子(2)。本研究中在我们实验室进行猪样品诊断试验，观察比较VG年变化率。

　　材料和方法

　　从2012年和2013年病猪获取样本，在麦康凯和血琼脂平板上，37℃过夜培养。大肠杆菌菌落鉴定，在98℃，通过100μL核酸酶去离子水进行细胞溶解10分钟，离心取上清液进行PCR。多重实时PCR鉴定毒素基因：ST1(STa)，ST2(STb)，LT1，EAST，Stx2e;菌毛和粘附因子基因：F4(K88)，F5(K99)，F6(987P)，F18，F41，AIAD和EAE。

　　结果及讨论

　　314株大肠杆菌分离株(2012年197株，2013年117株)，其中42.7%菌株VG为阴性，不进行进一步统计学分析。

　　观察溶血性大肠杆菌(HEC)和非溶血性大肠杆菌(NHEC)的毒力基因。分别在2012年和2013年，HEC的VG由93.2%降到84.2%，而NHEC由35.8增加到44.3%。观察毒素基因与粘附因子有无。HEC毒素基因伴有粘附因子比内有伴随的多8.6倍，而NHEC比毒素基因没有伴有粘附因子多3.1倍。在2012年，7.2%HEC粘附因子没有伴有毒素基因，而与2013年分离的发现不相似。

　　每个VG流行情况如图1所示。大量毒素和粘附因子基因为EAST和F4。菌毛F41在所有样品中没有观察到。

　　观察到25种明显致病型，但2年内仅观察到11种(图2)。6种致病型是其他类型出现2倍(图2中表*)，然而由于许多观察实际数值较低(5或更少)，故统计学上不能确定为显著性差异。剩下14中致病型在仅仅一年内观察到，但再次为很低数值。